Erythropoietin (EPO) adalah hormon alami yang disekresi oleh ginjal untuk merangsang produksi sel darah merah pada sumsum tulang. EPO merupakan salah satu glikoprotein rekombinan terapeutik pertama yang dikomersialkan untuk pengobatan anemia. Karakterisasi EPO sangat penting dilakukan oleh produsen guna memastikan keefektifan dari EPO yang diproduksi. Kebanyakan industri biofarma menggunakan mode Capillary Zone Electrophoresis (CZE) untuk melakukan karakterisasi EPO dengan mengacu pada European Pharmacopeaia.
Apa itu CZE?
CZE merupakan mode capillary electrophoresis yang paling sederhana. Mekanisme pemisahannya berdasarkan perbedaan rasio charge-to-ratio.
Capillary Zone Electrophoresis
Setelah sampel diinjeksi, tegangan akan diaplikasikan dan menyebabkan komponen-komponen pada sampel terpisah menjadi zona-zona (lihat gambar) akibat adanya perbedaan muatan dan ukuran dari komponen-komponen tersebut.
Dengan mengacu pada European Pharmacopoeia, dilakukan analisis EPO mengggunakan PA 800 Plus.
SCIEX PA 800 Plus
Berdasarkan hasil elektroferogram Biological Reference Preparation (BRP) EPO menggunakan PA 800 Plus, delapan isoform EPO dapat terpisah dengan baik dan sesuai dengan karateristik eletrofegram EPO yang dipaparkan oleh European Pharmacopeia.
Hasil elektroferogram EPO BRP menggunakan PA 800 Plus
Capillary Electrophoresis dapat diterapkan untuk karakterisasi EPO karena kemampuannya memisahkan isoform dengan resolusi tinggi dari campuran glikoprotein yang kompleks.
Referensi
Eroupean Pharmacopoeia 10.0 (2019)
Santos, Marcia R. 2014. Applying the European Pharmacopoeia Capillary Zone Electrophoresis Method for the Separation of Recombinant Human Erythropoietin (EPO) Using the ProteomeLab PA 800 Protein Characterization System
Santos, Marcia R. 2016. Separation of Recombinant Human Erythropoietin (rhEPO) using the European Pharmacopoeia Method on the PA 800 plus Pharmaceutical Analysis System
